板分子按5'→3'方向延长，合成新生DNA互补链。Р常规PCR技术能扩增两引物之间的DNA区段，然而，有时我们也盼望扩增位于靶DNA区段之外的未知DNA序列，这就须要应用反向PCR〔reverse PCR〕技术。 先用一种在靶DNA区段上没有识别位点的核酸内切限制酶，从距靶DNA区段有必须距离的两侧位置切割DNA分子，然后将这些片段作分子内连接成环形。依据确定的靶DNA序列按向外延长的要求设计一对向外引物，保证被扩增的是位于靶DNA区段两侧的未知DNA序列。Р反向PCR的根本操作程序。水纹线表示靶DNA区段，箭头表示限制性内切酶位点，分别用方框表示靶DNA区段的左侧和右侧序列。Р? 用一种在靶序列上没有酶切位点的核酸限制性内切酶消化DNA； ? 产生大小不同的线性DNA片段群体，其中靶DNA区段的DNA分子长度不超过2~3kb，经连接后重新环化；РРРРРРРРРРРРРР? 按靶序列设计的一对引物与互补序列退火结合，其延长方向如箭头所指； 转录Р一、依靠DNA的RNA聚合酶〔DDRP)Р① 以DNA为模板，以四种三磷酸核苷为底物，转录的方式是不对称的。 ② RNA链的延长方向是5’→3’的连续合成。 须要Mg2+或Mn2+。RNA聚合酶缺乏3’→5’外切酶活性，不须要引物 。 原核生物RNA聚合酶：Р细菌全酶由六个亚基组成，去掉δ亚基的局部称为核心酶〔α2ββ’ω 〕 亚单位 分子量 亚单位数 功 能Р α 36512 2 确定哪种基因被转录 β 150618 1 与转录全过程有关 Р РРРР本文来源：网络收集与整理，如有侵权，请联系作者删除，谢谢！
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