病,重组基因、易位的染色体,Ig的mRNA片段、癌基因片段等(4)检测导入基因(5)遗传病基因检测。Р2.2梯度PCR仪与PCR扩展仪的比较Р梯度PCR仪与PCR扩增仪器最大的不同就是在温度的控制上,梯度PCR仪主要是能在基因扩增的退火的过程中能够实现温度在某一区间范围内阶梯的控制,如研究某以样品的最适合的退火温度,在退火的过程中实现温度从45℃到55℃阶梯变化,通过一次扩增找到样品最适合的退火温度。Р2.3荧光定量PCR仪与PCR扩增仪的比较Р荧光定量PCR检测仪就是在PCR扩增仪器实现DNA复制的过程中对产物实时检测,通过产物数量的变化曲线来推算样品初始的DNA拷贝数。(注:荧光检测的原理和初始DNA拷贝数的计算方法见附录五)Р3.荧光定量PCR仪的主要分类Р金属板式定量PCR仪,各插孔独立控温的定量PCR仪和离心式定量PCR仪。Р3.1金属板式定量PCR仪Р在整个样品槽的上端多一个荧光检测设备如下图所示Р图6荧光检测的光学结构图Р荧光检测的光学结构工作原理:如图所示荧光的激发光源的通过设定的光路照射到样品孔板里被荧光染料或荧光探针标记的产物,使得产物发出荧光,通过一定的回路到达光敏接收器。再经过相应的软件工具在电脑上拟出光信号的变化曲线。Р图7目前市场上现有仪器的外形Р仪器的荧光检测设备在仪器的热盖中Р3.2各插孔独立式控温定量PCR仪Р这种PCR仪的特点就是金属板的设计上,把样品插槽单独分开,每个插槽能独立的控制温度变化,这样的设计能同时测量更多种类的样品,提高检测的效率。Р 图8 目前市场上现有的仪器外形Р3.3离心式定量PCR仪Р用空气作为加热的介质,温度均一性好,温度改变速率块。使用的是同一个激发光源和检测器,随时检测旋转到跟前的样品,有效减少系统误差;可容纳样品量少,有的需用特殊毛细管作样品管,增加了使用成本,也不带梯度功能。Р 图9目前市场上现有仪器的外形
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