水配成浓度为0.05~0.1%的溶液,如发现溶液有沉淀,可适当加量,最好随配随用,不宜存放过久。Р浸种Р 将四组样品浸温水中,浸时间因树种而异。松属树种的种子在室温条件下浸2~3天。Р取胚Р 剥种胚要细心,勿使胚损伤,要挑出空粒、腐坏和有病虫害的种粒,并计入附表5。剥出的胚先放入盛有清水或垫湿纱布的器皿中。全部剥完后再放入靛蓝溶液中,使溶液淹没种胚,上浮者要压沉。Р染色Р 染色时间因温度、树种而异,温度在20~30℃时需2~3小时;温度低于20℃要适当延长染色时间;温度低于10℃则染色困难,甚至不能染色。Р观察记载Р到达染色所规定的时间之后到出溶液,用清水冲洗种胚,立即将种胚放在垫湿纱布的器皿中。根据染色部位和比例大小来判断每一种胚有无生活力。计入附表6中。以松属为例,靛蓝法测定种子生活力的主要标志如下:Р有生活力者:胚全部未染色;胚根尖端少量染色;胚基部分有斑点状染色,但染色部位未成环状;子叶少许斑点染色。Р无生活力者:胚全部被染色;胚根全长1/3或超过1/3部分染色;胚基部分包括分生组织在内的种胚全长的1/3的部分染色;子叶染色。Р结果计算Р 分别统计各组有生活力种子的百分率,并计算四次重复的平均值。平均值计算到整数。按表7的规定检查几个重复间的差异是否为随机误差。如果各重复中最大值与最小值的差距没有超过容许范围,就用各个重复的平均值作为测定的生活力。Р(二)四唑染色法Р氯化(或溴化)三苯基四唑,简称为四唑,为白色粉末,分子式为C10H12N4CL(Br)。Р四唑的水溶液无色。被种子吸收的四唑盐参与细胞的还原过程。染色的是活细胞,未染色的为死细胞。以染色的位置和比例大小判断种子有无生活力。Р配制四唑溶液时,用中性蒸馏水(pH6.5~7)溶解,浓度用0.1~1%,一半用0.5%。浓度高,染色时间短。用磷酸盐缓冲溶解四唑盐。缓冲液的配制如下:溶液(甲)在1000毫升水中溶解
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