动相A,0.5%(ml/ml)丙酮溶液为流动相B,按下表设置梯度洗脱程序,检测器波长设为265nm,流量1.0ml/min,以水作为样品,进样20ul,执行梯度,记录色谱图。(表15)РTimeР(min)Р%流动相AР(水)Р%流动相BР(0.5%丙酮)Р0.0Р100Р0Р10.0Р100Р0Р15Р80Р20Р25Р80Р20Р30Р60Р40Р40Р60Р40Р45Р40Р60Р55Р40Р60Р60Р20Р80Р70Р20Р80Р75Р0Р100Р85Р0Р100Р按下式计算:Р, Gci=(Ci-G)÷GРGi为单元B的梯度;Hi为每步梯度的响应值;为100%流动相B时的响应值;Gci为梯度误差;G为设置的流动相B的比例Р7.3 柱温箱的确认Р选择35℃,45℃进行检定,启动柱温箱,设置柱温为规定值,通电升温,将已校正过的数字温度计或温度巡检仪探头放在柱温箱内,待温度恒定后,读取温度读数,每隔10分钟记录一次温度,共计7次,7次读数的平均值与设定值之差即为温度设定值误差(∆T),7次读数中最大值与最小值之差即为控温稳定性(Tc)Р7.4 紫外可变波长检测器Р7.4.1 波长示值误差Р取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg,精密称定,置1000ml量瓶中,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至刻度。将色谱柱与检测器连接管路断开,用注射器吸取水注射检测池,反复冲洗数次,开启仪器,设定检测波长为检定波长低10nm,加用注射器吸取上述重铬酸钾溶液,注入检测池反复冲洗数,使充满检测池,记录检测器响应值,每10s改变一次波长,每次增加1nm,直至检测波长比检定波长高10nm,记录每次改变波长后的检测器响应值,以响应值最大所对应的波长为仪器波长测定值,以波长设定值为横座标,响应值为纵座标绘制曲线图。需要检定的波长为:235nm,257nm,313nm与350nm。
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