使用预洗缓冲液处理可以冲走填料中的蓝色染料基。Р 分离条件的优化Р 最终效果的取决于样品的pH和离子强度。通过使用Bio-Gel P-6DG脱盐,或者通过透析,对血清的缓冲液的转换是非常重要的。按照表1中列出的缓冲液可以完全消除样品中蛋白酶,但当遇到使用不同的血清样品(含非РIgG蛋白吸附和修饰的IgG)需做出一些改变。因此,未被吸附的蛋白组分理论上会被除去,而只剩IgG,应该照以上所述一直监测蛋白活性。Р 如果在未结合蛋白组分显示少量活性蛋白组分,需要对缓冲液做出修改。这样有助于确定从未结合蛋白中提高IgG的回收率。Р 转移样品的缓冲液为20 mM Tris-HC1,Ph 8.0,并对柱子填料使用相同的缓冲液进行平衡。使用氯化钠溶液梯度洗脱,并收集与上样样品相同体积的样品。通过检测流出的蛋白酶来确定纤维蛋白中盐离子浓度。有无蛋白酶的片段能被合并,或作为二次血清样品来纯化,其氯化钠浓度比非IgG蛋白被发觉所用浓度要低一点。为了获得高纯度和高回收率的IgG,建议使用亲和蛋白A介质。Р 更多相关信息,请参照1092。Р 目录Р 页码产品描述Р 153-7307 DEAE Affi-Gel 蓝胶Р 脱盐和样品的制备Р 150-0738 Bio-Gel P-6DG 脱盐 Gel,100gР 150-0739 Bio-Gel P-6DG脱盐Gel,1kgР 732-2010 Econo-Pac 1oDG脱盐柱子,30*10mlР 732-0011 Econo-Pac P-6装胶筒,5mlР 其他IgG产品的纯化Р 732-0031 Econo-Pac DEAE 装胶筒,1*5mlР 732-0035 Econo-Pac DEAE装胶筒,5*5mlР 732-2026 Econo-Pac Serum IgG 纯化柱子Р 732-2027 Econo-Pac Serum IgG 纯化工具
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