olution) PPO (2,5- 二苯基)5.0g 、POPOP (1,4- 双- 5 -苯基) 0.5g 溶于 1000ml 二甲苯中。也可将 POPOP 加入二甲苯,在37℃水浴上溶解后,再加 PPO ,然后补足二甲苯。 3 H-TdR 工作液( woking Solution ) 按1:20 的比例将浓度为 1mCi/ml 的 3H-TdR 用无血清的 RPMI 培养液稀释, 终浓度为 50μCi/ml 。肝素溶液的配制: 含有肝素的培养液可以使内皮细胞纯度提高,肝素加入全培养液中最终浓度为50ug/ml 。因为现在市售的多为肝素钠,包装为约为 0.56 克/瓶,配制时,可将其溶于 100ml 三蒸水中,定容,过夜,然后过滤除菌,分装小瓶,保存温度为 4℃。使用时,向 100ml 培养液中加入 1ml (精确可加入 0.9ml )即可。Ⅰ型胶原酶: 0.1 %Ⅰ型胶原酶溶液同胰蛋白酶一样配制和消毒灭菌。注意:因为Ⅰ型胶原酶分子颗粒比胰酶大,不容易过滤,因此可以用蔡式滤器过滤除菌。分装入 10ml 小瓶-20 ℃保存。用时提前一小时 37 ℃复温即可. 0.1% 的I 型胶原酶的配置, 100m g 的粉末状的 I 型胶原酶可以溶于 100ml 的 DMEM/F12 , 0.22 微米滤器过滤 0.1% 的I 型胶原酶的配置, 100mg 的粉末状的 I 型胶原酶可以溶于 100ml 的 DMEM/F12 , 0.22 微米滤器过滤. 四、染色液配制( Prepration of Staining Solution ) 苏木素液(Hematoxylin Solution) : 苏木素 2.5g ,乙醇 25.0ml ,钾明矾 2.5g ,氧化汞 1.25g ,冰乙酸 20.0ml , 蒸馏水 500.0ml 。配制方法是先将苏木素溶于乙醇中(稍加热) 。将预先已溶解