的病原菌之一[3]。由于该病在一些养殖场中严重发生,兽医临床上抗菌药物不得不大量地被应用,导致大肠杆菌耐药菌株不断出现,耐药谱不断扩大,形成恶性循环;同时加剧了抗菌药物在畜禽体内的残留,给养禽业的持续发展和人类的身体健康带来潜在危害[4]。Р随着单县养鸡业的迅速发展与高度集约化饲养,鸡大肠杆菌已成为鸡群中重要疾病之一。2010年9月,单县浮岗水库散养鸡舍所饲养的鸡于24天开始发病,两天之内,死亡21只。病鸡多精神沉郁,食欲减退,腹部膨大,粪便呈灰绿色或黄色,本实验室对单县送检的病鸡48只,病死鸡进行了剖检、病理学诊断和病原检测,确诊该鸡场发生了大肠杆菌病,筛选出对这些致病菌比较敏感的几种药物进行治疗,控制疫情。Р1 材料Р1.1 病料来源 Р所有病料来自于单县六和饲料公司、华英禽业、浮岗水库等六大鸡场提供的病鸡,初步确诊为大肠杆菌病,病鸡48只,其中死亡35只,死亡鸡死亡时间不超过24h,其中肉仔鸡、蛋雏鸡27只,产蛋鸡21只。Р1.2 仪器及设备 Р光学显微镜、恒温箱、高压灭菌器、无菌实验台、微量移液器等(由山东省单县六和化验室提供)。Р1.3 培养基与试剂 Р麦康凯琼脂(NA)、伊红美兰琼脂、普通肉汤、营养琼脂(NA)验所用的培养基均参照《兽医微生物实验指导》制备。Р硝酸盐还原剂、氧化酶试剂、微量生化试验管(购于菏泽畜牧兽医学校)Р、药敏纸片购自单县畜牧兽医站(上海市医学化验所试剂厂生产)Р1.4 试验动物 。Р小白鼠(购于菏泽畜牧兽医学校)和各日龄健康鸡(购自浮岗水库分散养殖场)。Р2 方法Р2.1 病理剖检Р对送检的35只病死鸡进行了病理剖检及大体病变的观察。Р2.2 大肠杆菌的分离鉴定操作流程如下:Р样品Р↓Р在各种培养基上划线分离(置37℃培养24h)Р↓Р菌落形成Р↓Р—————————————————————Р↓↓↓Р挑取菌落染色镜检纯培养培养特性检查