制备,小柱子进行分析。Р出现过的问题(3)Р5、开机使用pumpwashА注意:为避免对泵造成损伤,开机运行后不要立即使用pumpwash,应先用低流速走几分钟。保证抽过泵头后,可省略pumpwash。Р6、平衡时忘关紫外灯。А紫外灯寿命(2000小时),成本10000元Р7、压力偏高时请不要降低流速继续使用;А考虑更换滤器和通知管理员冲洗柱子。Р出现过的问题(4)Р8、所有配件和说明书使用完后必须归位。Р9、压力偏高或偏低? 更换在线滤器或重新校准。Р10、紫外不稳А继续平衡,若平衡好后,还不稳定,可冲洗紫外流通池,如不能解决,则需通知管理员用NaOH再生系统和纯化柱。Р出现过的问题(5)Р11、进样用力过猛А进样不要太用力,否则会堵塞阀门,可通过反方向进样,使阀门回到原位置。Р12、色谱柱保存不当А阳离子交换柱需保存在20%乙醇+0.2M醋酸钠中,一般柱子的保存条件为20%乙醇,但阳离子交换柱保存时,需要在其中加入0.2M醋酸钠。Р出现过的问题(6)Р13、上清液直接进样А或样品含8M 尿素、SDS等剧烈条件。А虽然柱子说明上允许这样的条件,但是最好不要使用,否则会严重影响柱效和使用寿命。Р14、进样样品处理不充分А进样之前的样品一定要仔细处理,尽量少的引入杂质,并且蛋白本身必须稳定。样品进样前需过0.22的膜,或者15000rpm离心。注意:蛋白样品用sigma离心机离心效果不明显,可以用小离心机分管离心。Р出现过的问题(7)Р15、收集器不转? 收集器可能接触不良,收集样品更好管子时,不转,导致已收集的EP管中样品溢出。Р16、使用完毕忘记收柱子? 做完实验,冲完20%乙醇,忘记拆柱子!Р17、固定好柱子? 实验过程中,柱子没有固定好,比如分子筛柱子,要用橡皮筋绑好!Р18、收拾收集器? 实验结束之后,及时清理收集器里面的EP管,把不用的废液丢弃。保存好自己的样品。
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