动物细胞或转基因动物来表达。Р6Р原核表达系统操作简单、成本低、周期短,应用最为广泛,但不能对表达产物进行糖基化,且细菌类毒素污染很难去除。重组的蛋白常以包涵体形式分泌,要在体外折叠,费时费力,这使得大规模生产抗体受到限制。?真核表达系统是最接近天然产生抗体的表达系统,比较成熟且应用较多。主要用于表达完整抗体分子,已可达到100mg/L的表达水平。但真核细胞培养有难度,需要附加设备,需要去除癌基因序列,防止病毒污染等。Р7Р蛋白表达系统Р大肠杆菌表达系统Р昆虫细胞表达系统Р哺乳动物表达系统Р酵母表达系统Р真核表达系统Р存在一些蛋白不能有效地折叠,发酵周期较长,容易污染,需要考虑表达产物的卫生安全性,筛选产物价格昂贵,有时表达产物没有生物活性等问题都为临床生产和应用带来了不便,也存在产物低表达或不表达的问题,产物纯化问题依然存在Р外源基因不能持久稳定地表达,而且表达成本很高,技术背景复杂Р存在不正确的糖基化修饰,且表达量低Р原核表达系统具有吸引力的原因在于它的成本低、生产率高和能够大规模快速的生产等优点Р8Р第二节原核表达系统Р原核表达是指通过基因克隆技术,将外源目的基因,通过构建表达载体并导入表达菌株的方法,使其在特定原核生物或细胞内表达。人们为了获得高水平的基因表达产物,通过综合考虑控制转录、翻译、蛋白质稳定性及向胞外分泌等诸多方面的因素,设计出了许多具有不同特点的表达载体,以满足表达不同性质、不同要求的目的基因的需要。Р9Р原核细胞表达系统基因表达的主要特点是:?1、原核生物只有一种RNA酶,识别原核细胞启动子,催化所有RNA的合成,且其基因表达是以操纵子为单位。?2、转录和翻译是耦联的,连续进行。?3、缺乏真核细胞转录后的加工系统,不能去除内含子。?4、原核细胞的基因控制主要在转录水平。?5、在大肠杆菌mRNA核糖体结合位点上,有一个转录起始密码子和S-D序列。Р10
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