体之间共同的高度保守序列,也可以从数据库选择合适的序列进行合成。扩增产物可用琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis) 或使用内部探针的点印迹法进行检测。 Innis 等(1990) 曾著文专门介绍 PCR 方法在感染病理学诊断的应用。 PCR 在检测 nM A 靶分子的灵敏度是其他方法难以比拟的, 而且标本处理十分简单。在检测节肢动物中的原核生物时, 只要煮沸 10 分钟。这种方法也很适合于实验室对海洋无脊惟动物中, 由于人为或天然而受立克次氏体及病毒感染的组织和幼体的检测。尤其在对养殖对象进行大规模转移之前进行 PCR 检测, 判断动物是否有病原体感染,是一种既安全又可靠的办法。(3) 原位杂交(in situ hybridization) 原位杂交是用放射性或非放射性标记的已知序列 DNA 或 RNA 探针, 在细胞或染色体上, 与其互补的核酸序列配对杂交, 再经放射自显影或免疫荧光、化学发光在杂交原位上显示杂交体的技术。原位杂交技术包括四大步骤: 细胞或染色体样品制备、探针的制备与标记、原位杂交反应和杂交结果的显示与分析。目前,原位杂交已成为简捷、快速检测细胞感染,特别病毒感染的手段,甚至可以检测标本中每个细胞有几个靶分子。原位杂交通常采用良好固定下具有清晰组织学细微结构的材料。水产养殖中最令人感兴趣的是利用细胞涂片所进行的原位杂交,以避免石蜡切片中所遇到的复杂步骤和程序。综上所述,贝类和虾类病原体的分子诊断目前已经起步。这些实践表明,水产养殖病理学可以应用在人和兽医医学上所采用的分子生物学新方法。在应用这些方法上,主要的困难在于病原体的提纯。贝类和虾类感染病原体的诊断的未来主要依赖于研究和临床应用过程科技工作者以及诊断技术的使用者之间的有效合作。可以预料在我国水产养殖中,随着科技投入的增加,分子生物学的诊断手段将得到愈来愈广泛的应用。
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