医学课件-艾滋病感染实验室检测

、HCV、HIV等);?②仅需少量标本或标本中仅含少量病毒也能检测;?③在病毒感染的急性期抗体尚未出现之前,病毒感染的诊断主要依靠NAT,适用于早期诊断;?④可对病毒进行定量检测,有助于疗效监测;?⑤可对病毒基因进行基因分型,比血清分型更有价值;?⑥通过对病毒耐药基因的检测,可预测或发现病毒的耐药性;?⑦可用于先天性或围产期获得性病毒感染的诊断;?⑧灵敏度高(可达ng甚至fg水平,理论上能检出单个病毒基因),特异性好、快速、简捷。Р2006年10月12日浙江省艾滋病治疗培训班Р定量NASBA技术:Р是由一对引物引导的,连续均一的体外特异核苷酸序列的等温扩增的酶促反应过程。? 优点:操作十分简单,只需将制备好的模板直接加到反应体系中,恒温41℃培育1.5~2小时,即可将模板扩增109倍。? NASBA反应体系包括AMV反转录酶、RNA酶H、T7RNA聚合酶、核糖核苷三磷酸、脱氧核糖核苷三磷酸、两个特异的引物及适宜的缓冲液。? NASBA的反应分为两相:循环相和非循环相。Р2006年10月12日浙江省艾滋病治疗培训班РNASBA图解Р引物1Р逆转录酶РRNA酶HР逆转录酶?引物 2РT7 RNA多聚酶Р引物 2Р逆转录酶Р逆转录酶РRNA酶 H?引物1Рliniar phaseРamplification phaseР2006年10月12日浙江省艾滋病治疗培训班РPCR反应图解Р2006年10月12日浙江省艾滋病治疗培训班РbDNA信号扩增技术Р主要包括分枝DNA检测(branched DNA assays)和杂交捕获检测(hybrid capture assays)。Р 检测时病原模板并不扩增,而是通过对检测信号的放大来实现对病毒核酸的检测和定量。Р2006年10月12日浙江省艾滋病治疗培训班РbDNA HIV 核酸检测的反应原理Р2006年10月12日浙江省艾滋病治疗培训班