胞骨架中的蛋白质却不被破坏，经固定和考马斯亮蓝（非特异性蛋白质染料）染色后，胞质背景着色弱，微管等蛋白结构在光镜下无法分辨，在光镜下观察到主要是由微丝组成的应力纤维。? 应力纤维由平行排列的微丝组成，体外培养的贴壁细胞应力纤维尤为发达，形态长而直，常与细胞长轴平行并贯穿细胞全长。РРРРРРР微丝在细胞内的分布特征РРРР[实验用品]Р器具：CO2恒温培养箱、倒置显微镜、超净工作台、低速离心机、普通光学显微镜、移液器、恒温箱、镊子、培养皿、载玻片、盖玻片、吸水纸。?材料：盖玻片培养的成纤维细胞?试剂：6 mmol/L PBS（pH 6.5）、1％TritonX-100溶液、M-缓冲液、3％戊二醛固定液、0.2％考马斯亮蓝染液、DMEM培养液。РРРР[实验步骤]Р1. 培养 在成纤维细胞进行传代培养时，将已消毒的盖玻片涂上多聚赖氨酸，放入培养皿中，于37℃、5%CO2的温箱中生长24h～48h。?2. 染色处理?（1）取材 取出铺有细胞的盖玻片，放入小培养皿中（正面向上）,用PBS洗3次,洗去表面的培养液。?（2）抽提 吸管吸弃PBS，加入1% Triton X-100液4-5滴（刚好覆盖盖玻片表面），室温处理10minРРРР（3）稳定吸管吸弃Triton X-100，立即用M-缓冲液轻轻地洗涤3次。? ?（4）固定 略晾干，在3%戊二醛液中固定10min，再以 PBS液洗3次，洗去固定液。? ?（5）染色 滴加3-5滴0.2%考马斯亮兰染液染色? 10 min，然后小心的用自来水漂洗。??（6）观察 留取少量水分封片于载玻片，吸水? 纸吸去多余的水。光镜下观察临时装片。РРРР[实验结果]Р光镜观察，微丝聚集成的应力纤维束被染成蓝色，成纤维细胞多数有突起，微丝沿突起规则排列。
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