常用分子生物学技术的原理及应用784

印迹技术?Molecular Hybridization & Blotting TechnologyР第二页，共五十二页。РРРР核酸分子杂交 (nucleic acid hybridization ) ?在DNA复性过程中，如果把不同DNA单链分子放在同一溶液中，或把DNA与RNA放在一起，只要在DNA或RNA的单链分子之间有一定的碱基配对关系，就可以在不同的分子之间形成杂化双链(heteroduplex) 。Р一、分子杂交与印迹技术的原理Р第三页，共五十二页。РРРРРРРРРРРРР复性РRNAРРDNAР第四页，共五十二页。РРРР（一）印迹技术?（二）探针技术Р探针 (probe) ?一小段用同位素、生物素或荧光染料标标记其末端或全链的已知序列的多聚核苷酸，与固定在NC膜上的核苷酸结合，判断是否有同源的核酸分子存在。Р第五页，共五十二页。РРРР二、印迹技术的类别及应用Р（一）DNA印迹技术 (Southern blotting) ? 用于基因组DNA、重组质粒和噬菌体的分析。Р（二）RNA印迹技术 (Northern blotting) ? 用于RNA的定性定量分析。Р（三）蛋白质的印迹分析 (Western blotting) ? 用于蛋白质定性定量及相互作用研究。Р第六页，共五十二页。РРРР其他?斑点印迹 (dot blotting) ?原位杂交 (in situ hybridization)?DNA点阵 (DNA array) ?DNA芯片技术 (DNA chip)Р第七页，共五十二页。РРРР三种印迹技术的比较Р第八页，共五十二页。РРРР③РР分子杂交实验Р①Р②РРРРРР目 录Р第九页，共五十二页。РРРР放射自显影照片РРРРР目 录Р第十页，共五十二页。