5分钟后,加入 0.1 mol/ L的盐酸稀释至刻度。摇匀,再避光放置 30 min ,随行空白。以对照品取样量为横坐标,吸光度为纵坐标(表 2),绘制标准曲线(图 5),并进行线性回归,得回归方程为 Y= 0.2428 X -0.0004, r=0.9997, n= 7。结果表明,对照品在 0.0436 ~0.3052 mg 范围内与吸光度呈良好的线性关系。表2对照品标准曲线结果序号 1234567 体积( ml )0.2 0.4 0.6 0.8 11.2 1.4 质量( mg ) 0.0436 0.0872 0.1308 0.1744 0.218 0.2616 0.3052 A0.109 0.221 0.32 0.431 0.539 0.643 0.765 图5 阿魏酸对照品的标准曲线 2.7 测定方法取脱脂后的柠檬桉叶 10g,置于烧瓶中,按 L 9 (3 4)正交试验表设计加入不同浓度的乙醇水浴回流(约 80℃)提取不同时间、次数,制备相应的提取物, 收集提取液,抽滤,取水相并定容于容量瓶,备用。按“2.4 ”项下测吸光度,计算柠檬桉叶总酚含量,进行方差分析,结果见表 3~ 4。9 2.8 结果经直观分析和方差分析可见, 各因素的影响顺序为提取时间> 乙醇浓度>固液比>提取次数。提取时间对柠檬桉叶中总酚的提取率的影响最具有统计学意义, 而提取时间和乙醇浓度对柠檬桉叶中总酚的提取率的影响是显著的,其余 2个因素对柠檬桉叶中总酚的提取率的影响不显著的,对因素 C 进行分析,确定优水平是 C 3, 对因素 A 进行分析,确定优水平是 A 3, 因素 B、D 的水平改变对试验结果影响小,从经济角度考虑,选B 1、D 1,优水平组合为 A 3B 1C 3D 1,即柠檬桉叶中总酚的最佳提取工艺条件为乙醇浓度为 90% ,料液比为 1:5 ,提取时间为 3h, 提取次数为 1次。
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