p54&小鼠腹水地杂交痛细胞(B细胞图注入小鼠\r单克隆抗体।鼠鹿*小心1M叫价髓瘤细胞\r*GenBank是一基因数据库名称\r回答下列问题。\r(1)步骤①中获取目的基因的方法是.若/S51/夕54基因序列中无限制酶切位点,为确保ASFVp54\r基因与pET28a载体正确连接,在步骤①中应\r^亥.\r(2)步骤②中最常用的转化方法是用处理细胞。步骤④处理的目的是\r(3)获得杂交瘤细胞后,在注入小鼠腹腔之前还应进行一\r_O\r(4)利用ASFVp54单克隆抗体能快速、准确诊断ASF的原因\r是0\r答案⑴人工(化学)合成在ZS51/夕54基因编码区两侧加入pET28a载体上存在的两种限制酶识别序列\r⑵Ca2*诱导小鼠产生能够分泌抗ASFVp54抗体的B淋巴细胞⑶克隆化培养和抗体检测(4)ASFV\rp54单克隆抗体特异性强、灵敏度高\r解析(1)步骤①利用查询出的/Sr1/夕54基因序列合成ZS厂/夕54基因,属于人工合成法中的化学合成法。\r若/S尸1/夕54基因序列中无限制酶切位点,为确保/S尸匕954基因与pET28a载体正确连接,在目的基因的合\r成过程中应该在基因编码区两侧加入pET28a载体上存在的两种限制酶识别序列。(2)将基因表\r达载体导入大肠杆菌细胞的常用方法是Ca2+参与的转化法,即用Ca2+处理大肠杆菌细胞,使之处于易于吸收\r环境中DNA分子的状态。步骤④将ZS尸l/p54基因表达的ASFVp54蛋白注入小鼠体内是为了诱导小鼠\r产生能够分泌抗ASFVp54抗体的B淋巴细胞。(3)获得杂交瘤细胞后,在注入小鼠腹腔之前还应进行克隆化\r培养和抗体检测,以便产生足够多的可产生ASFVp54单克隆抗体的杂交瘤细胞。(4)单克隆抗体具有特异性\r强、灵敏度高的特点,故利用ASFVp54单克隆抗体与抗原特异性结合的特点能快速、准确诊断ASF。\r
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