理,用SPA标记物(酶、荧光、放射性等标记)显示抗原与抗体结合反应的各种免疫检测试验。最早于1982年建立了酶标SPA的ELISA试验。(一)原理:SPA可从金黄色葡侑球菌细胞壁中提取,为395个氨基酸组成的多肽,有四个能少IgG的Fc结合的位点,即一个SPA分子町结合4个IgG分子。SPA可与人、猪、狗、小鼠、豚鼠、成年牛、绵羊等20多种动物IgG结合,而与兔IgG的结合力报道不一,鸡、-马、山羊、犊TlgG不能与SPA结合。因此,制备SPA标记物后,可应用于多种动物,不受种属限制,可应用于同种动物的各种免疫检测(如猪的各种传染病的解标检测),冇了SPA标记物,就不需标记各种抗体或抗原,即SPA标记物可作为一个通用试剂,它使免疫检测方法向更简便、更商品化进了一大步。?(二)应用:1.SPA放射免疫分析:在固相放射免疫分析中,可利用I125-SPA代替标记的抗抗体。先将抗原包被于固相载体,然后加入被检血淸作用洗涤后,加入I125-SPA作用,洗去未结合的部分,计数测定管小的放射活性。此法灵敏度高,可测IIIng/ml的抗体含量,需时短,重复性好。同样也可建立检测抗原的SPA放射免疫分析。2.SPA酶标检测技术:用辣根过氧化物酶标记的SPA(IIRP-SPA)可用于酶免疫组织化学法染色。由于HRP-SPA比HRP-IgG分子小,能更好地穿过细胞膜,使在免疫电镜亚细胞水平定位分析中具冇更好的辨析力。用HRP-SPA建立的ELISA则具更多的优越性,即它可作为多种动物,以及同-•种动物多种抗原抗体检测的通用试剂,已经得到了广泛的应用。如国内已建立了检测猪瘟的SPA-ELISA试剂盒。3.SPA荧光抗体技术:荧光SPA主要用于淋巴细胞表面标志研究,亦可代替荧光抗体进行•病毒抗原、刖|瘤抗原等的检测。4.SPAJE它标记技术:SPA其它标记技术还有PA胶体金、SPA-发光免疫技术等。
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