，利用二抗作为桥梁将三抗与一抗连接起来，三抗的标记酶经酶促反应，即可在抗原位置上呈现有色阳性反应产物。Р PAP法则是借助二抗的桥梁作用，将PAP/ALP复合物连接在与组织抗原结合的一抗上。PAP复合物由3分子酶和2分子的抗酶抗РРРР体构成，抗酶抗体和一抗为同种属动物的IgG，经相应的酶促反应，可通过显微镜观察到阳性结果。Р优点Р 酶桥法3种抗体均被酶标记，酶是通过免疫学原理被标记在三抗上，避免了因化学方式结合对抗体和酶活性的损害，提高了方法的敏感性，节省了一抗的用量。Р PAP法抗体活性高，灵敏度高，背景染色低。Р缺点Р 酶桥法标记的酶类很难被精确的稀释到恰当的浓度，以达到和三抗的抗酶部位全部结合，同时也难以彻底洗脱掉与标本中其他成分非特异性结合的酶，造成较高的非特异性染色。РРРРPAP法染色步骤较多，需要的染色时间长。Р4РABC法РSP法РР原理Р ABC法即抗生物素-生物素-过氧化物酶法，它的关键是ABC复合物，由一个卵白素分子结合3个生物素化的过氧化物酶分子构成。卵白素作为“桥”连接在生物素标记的过氧化物酶与生物素标记的抗体之间，于是形成一个含有3个以上过氧化物酶分子的网格状复合物，通过ABC复合物中卵白素与生物素化抗体结合，经过组织化学的酶显色反应，达到检测组织或细胞原位内抗原的目的。РРРР SP法即链霉抗生物素-生物素法，与ABC法相似，不同的是链霉抗生物素蛋白与生物素化酶（HRP）结合，形成链霉抗生物素-生物素化酶复合物，这种复合物再与生物素标记的二抗结合，通过酶的显色反应检测抗原存在的部位。Р优点Р ABC法敏感性高（相对于PAP法），特异性强，尤其适用于单克隆抗体，组织背景染色浅，操作方法简便，节省染色时间。РSP法相比ABC法，有效地降低了内源性生物素带来的非特异性反应的程度，敏感性增加了4-8倍。Р缺点
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