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培养基制备的基本方法和注意事项

上传者:徐小白 |  格式:doc  |  页数:3 |  大小:18KB

文档介绍
趁热以绒布过滤即可。若能自行沉淀者,亦可静置冰箱中 1-2 日、吸取其上清液即可。 7. 培养基的分装培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的 2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵, 其外还双用防水纸包扎( 现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时最好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂抖面培养基时,分装量应以能形成 2/3 底层和 1/3 斜面的量为恰当。分装容器应予先清洗干净并经干烤消毒, 以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装 20ml 培养基于一小玻瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基最终 pH 之用。 8. 培养基的灭菌一般培养基可采用 121 ℃高压蒸汽灭菌 15 分钟的方法。在各种培养基制备方法中, 如无特殊规定,即可用此法灭菌。某些畏热成分,如糖类,应另行配成 20% 如或更高的浓液,以过滤或间歇灭菌法消毒,以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和抗生素等则应从无菌操作技术抽取和加入于经冷却约 50℃左右的培养基中。琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出、待冷至 55-60 ℃时, 摆置成适当斜面、待其自然凝固。 9. 培养基的质量测试每批培养基制备好以后.应仔细检查一遍:如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其最终 pH。将全部培养基放入 36±1℃恒温箱培养过夜,如发现有菌生长,即弃去。用有关的标准菌株接种 1-2 管或瓶培养基,培养 24- 48 小时,如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次,如结果仍同前,则该批培养基即应弃去,不能使用。 10. 培养基的保存培养基应存放于冷暗处,最好能放于普通冰箱内。放置时间不宜超过一周,倾注的平板培养基不宜超过 3 天。每批培养基均必须附有该批培养基制各记录副页或明显标签。

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