示。大肠埃希菌分解葡萄糖和乳糖产酸产气,伤寒沙门菌分解葡萄糖产酸不产气,不分解乳糖。 2. 2.吲哚试验(靛基质试验) 吲哚试验(靛基质试验) 【原理】: 有些细菌具有色氨酸酶,能分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚,与吲哚试剂形成红色化合物。【方法】: 大肠埃希菌和伤寒沙门菌分别接种于蛋白胨水培养基中, 35oC18-24h 后,加入吲哚试剂数滴, 静置分层,观察结果。【结果】: 在培养物液面上层呈玫瑰红色为阳性,不变色者为阴性。大肠埃希菌为阳性,伤寒沙门菌为阴性。 3. 3.甲基红试验甲基红试验【原理】: 某些细菌分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸可进一步分解为甲酸、乙酸等酸性物质,故培养基 pH 在4.5 以下, 加入甲基红指示剂后呈红色(阳性);有些细菌分解葡萄糖产生的酸进一步化为醇、酮等非酸性物质,使培养基 pH 在6.2 以上,加入甲基红指示剂后呈黄色(阴性)。【方法】: 大肠埃希菌和产气肠杆菌分别接种葡萄糖蛋白胨水培养基中, 35oC18-24h ,加入甲基红指示剂 2-3 滴观察结果。【结果】: 红色为阳性,黄色为阴性。大肠埃希菌为阳性, 产气肠杆菌为阴性。- + 4.V-P 4.V-P ( ( Voges-Proskauer Voges-Proskauer )试验)试验【原理】: 某些细菌分解葡萄糖生成丙酮酸,进一步脱羧生成乙酰甲基甲醇,在碱性环境下被氧化成二乙酰,后者与蛋白胨中的精氨酸所含的胍基起作用,生成红色胍缩二乙酰,为 VP试验阳性。若培养基中胍基含量少,加入少量含胍基的化合物如肌酐,以加速其反应。【方法】: 大肠埃希菌和产气肠杆菌分别接种于葡萄糖蛋白胨水中, 35oC,24-48h ,加入 VP试剂甲液和乙液各 1滴,充分摇动, 观察。【结果】: 红色为阳性,若为阴性应再培养 4h观察,仍无红色者为阴性。大肠埃希菌阴性,产气肠杆菌阳性。
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