也包含着十分有用的信息。例如南开大学硕士学位论文生物大分子和合成高分子在溶液中往往具有多种不同的构象,因此相应的荧光衰减应该表现为多指数衰减的形式。用时间分辨荧光各向异性研究供体和受体问的能量转移时,不仅可以得到能量转移效率,而且可以揭示受体在供体周围的分布形式。利用时间分辨荧光技术可以揭示荧光猝灭是自由扩散控制还是特异性结合控制。实际上许多分子问或分子内的弱相互作用信息,特别是动态信息,只有通过时间分辨荧光技术刁’能得到。例如表面活性剂类两性分子在溶液或界面上的组装,纳米材料在存储过程中的相互聚梨18】,蛋白质或其它大分子在固液界面吸附过程中的构象调整【1?,大分子与大分子、大分子与小分子、大分子与金属离子等相互作用所引起的大分子构象变化以及这种变化发生的程度和部位[20]等重要问题都有可能通过时间分辨荧光技术进行深入研究。此外,近年来时间分辨(荧光)成像(Time—ResolvedImaging)技术[zl】在临床检验上也获得了越来越广泛的应用。生物芯片技术的一个重要内容就是利用芯片一h荧光标记物与待测液中底物的特异性作用实现对待测物的高效检测。随着时间分辨荧光光谱仪的日渐普及和测量技术的不断完善,时间分辨荧光技术必将在未来的研究中发挥越来越重要的作用。1.4本章小结我们概述了荧光的产生机理和荧光寿命等基本概念的定义,介绍了基于荧光寿命测定的时间分辨荧光光谱技术在众多领域中的应用。脉冲取样法则是目前被广泛用来测量超快荧光衰减过程的时间分辨荧光光谱技术,它具有准确性高、测定速度快、操作方便等特点。但在测定微弱荧光时,由于噪音的干扰,影响了信号的测量。因此如何有效地运用脉冲取样技术实现对微弱荧光超快衰减过程的测量是一个亟待解决的问题。本论文将针对这个问题进行讨论和研究,通过计算机模拟和实验验证来分析实验参数对测量结果的影响并提出了一种可以有效提高信噪比和测量精度的实验方法。
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