壤中细菌的检测1、在超净工作台中,无菌称取所取土样10g,分别溶于装90ml无菌水及玻璃珠三角瓶中,于摇床震荡30分钟。用移液管分别无菌吸取各样品土壤悬液1ml移入装9ml无菌水试管中,此即为10-2稀释的土壤悬液。如此操作,一直到10-10。稀释。(另外,要知道所称土样的含水量)2、分别无菌吸取各样品10-5>10-6.10-7>10・8稀释液,加入灭菌平皿中(每稀释度3皿,每皿Iml),倒人45°C恒温水浴的灭菌牛肉膏蛋白腺培养基,混匀。(稀释倍数是情况而定)3、待培养基凝固后,将平皿倒置于37°C恒温培养箱中培养。4、培养24h后,取出培养平皿,选出土样适合菌落计数的稀释度,算出同一稀释度3个平皿上的菌落平均数(选择平均菌落数在30-300之间的),并按下列公式进行计算,最后换算成每克干土壤中菌落形成单位。每克土壤中菌落形成单位=同一稀释度3次重复的平均菌落数X稀释倍数。三、土壤中真菌的检测1、在超净工作台中,无菌称取所取土样10g,分别溶于装90ml无菌水及玻璃珠三角瓶中,于摇床震荡30分钟。用移液管分别无菌吸取各样品土壤悬液lml移入装9ml无菌水试管中,此即为10-2稀释的土壤悬液。如此操作,一肓到10-10。稀释。(另外,要知道所称土样的含水量)2、?分别无菌吸取各样品10-2>10-3.10-4>10-5稀释液,加入灭菌平皿中(每稀释度3皿,每皿Iml),倒人45°C恒温水浴的灭菌马丁氏(Martin)琼脂培养基,混匀。(稀释倍数是情况而定)3、?待培养基凝固后,将平皿倒置于2LC恒温培养箱中培养。4、?培养48h后,取出培养平皿,选出土样适合菌落计数的稀释度,算出同一稀释度3个平皿上的菌落平均数(选择平均菌落数在30-300之间的),并按下列公式进行计算,最后换算成每克干土壤中菌落形成单位。每克土壤中菌落形成单位=同一稀释度3次重复的平均菌落数X稀释倍数。
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