核素稀释法

析前身物和产物的关系,这一实验在研究物质代谢和药物代谢时具有十分重要的意义。设某化合物的代谢顺序是:A→B→C若A是标记前身,它能掺入B和C。当标记前身A的量不变,加入非标记的A时,标记前身A的标记原子被稀释,B和C的放射性比活度也相应降低。如加入非标记B而使掺入产物C的标记原子减少,放射性比活度下降,表明B可能是A→C的中间代谢产物。如曾认为一种化合物AIC(4-氨基-5-咪唑甲酰胺)是由甘氨酸转变为次黄嘌呤的中间产物。实验采用14C-甘氨酸作为前身物,加入非放射性AIC为载体,发现次黄嘌呤的放射性比活度并没有因为加入上述载体而降低,从而否定了AIC是中间代谢产物的看法。除测定生理性代谢物质外,利用稳定性核素正稀释法还可测定血浆、羊水和母乳中的药物浓度。也可用标记药物作示踪剂,用反稀释法测定其血浓度(图5-3)。此法可测定少量体液中的ng到pg水平的巴比妥盐和二苯基乙内酰脲及吗啡等很多药物。由于灵敏度高,可以追踪药物的清除过程,而获得许多有价值的资料。图5-3稳定核素稀释法测定血浆中雌二醇含量三、测定标记物的纯度及稳定性核素反稀释法是标记物纯度鉴定的有用方法之一。核素反稀释法还可用来测定复杂介质中标记物的稳定性。例如,测定维生素B12及其相似物脱二甲苯并咪唑在胃液中的稳定性。后者通过口服被人体吸收的量少于前者,曾认为是由于在胃液中被破坏。用核素稀释法进行测定,将两种物质的标记物和人胃液在37℃保温。t=0,放射性活度为A0,放射性比活度为S0,其量为X0。温育4~5h后,加入大量非标记物,其量为Y,时间为t时,标记物量为X;用适当方法将混合物分离出一部分,测出放射性比活度为St。当载体量很大时,即Y>>X0或S0/St>>l,则XS0=YSt,即在t时,标记物存留量为经测定,两种标记物在温育一定时间后,存留量均超过95%,从而否定了认为脱二甲基化合物在胃液中不稳定的看法。