、高压锅恢复抗原法、煮沸恢复抗原法免疫荧光组织化学:采用荧光素标记的已知抗体(或抗原)作为探针,检测待测组织、细胞标本中的靶抗原(或抗体),形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,分辨出抗原(或抗体)的所在位置及其性质,并可利用荧光定量技术计算其含量。荧光抗体的标记直接法:优点:操作简便、特异性高缺点:敏感度偏低、抗体制备麻烦间接法:优点:较直接法灵敏,标记一种抗体可以鉴定多种抗原缺点:非特异荧光、操作时间较长补体法:优点:敏感度较高、标记一种抗体可以鉴定多种抗原、适用于任何动物的抗原抗体系统非特异性荧光消除用非免疫血清或10%牛血清白蛋白温育切片封闭非特异抗原位点、动物肝粉吸收荧光抗体中非特异性成分、层析或透析去除游离荧光素,纯化荧光抗体、将抗体的浓度调整到高稀释度、选择适合的切片方法、封固剂、镜油必须无自发荧光、用高渗盐浸洗,降低非特异性染色背景、伊文氏蓝衬染法酶免疫组织化学:应用酶标抗体(抗原)与组织或细胞标本中的抗原(抗体)反应,催化底物产生显色反应非标记抗体酶免疫组化染色:酶通过免疫学反应与抗酶抗体及组织抗原上的第一抗体结合,最后经酶分子催化底物的显色反应,达到对抗原的检测酶桥法:抗酶抗体作为第三抗体,通过第二抗体作桥抗体,将结合在组织抗原上的第一抗体与第三抗体连接起来,最后形成酶联的抗原-抗体复合物PAP法:是酶桥法的改良法。PAP法将酶桥法的第三抗体(抗酶抗体)与酶形成一种稳定可溶性(PAP复合物)双桥PAP法:是在PAP法中通过两次连接桥抗体和PAP而建立起来的,通过双桥可结合更多的PAP复合物于抗原分子上。对抗原有明显放大作用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)法:有些组织细胞富含内源性过氧化物酶,染色不宜使用HRP体系。用碱性磷酸酶代替HRP建立碱性磷酸酶(AP)-抗碱性磷酶(AAP)法,含有内源性HRP的组织切片:首选标记酶为AP亲合组织化学
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