片Р修整蜡块:可视其组织的大小,在组织边缘约0.1~0.2cm处,切去余蜡部分,否则易造成组织皱缩不平。Р安装蜡块:将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上。Р安装切片刀:将切片刀安装在切片机的刀台上,把刀台上的紧固螺丝旋紧,使切片时不产生振动,能保持一定的切片厚度。Р切片:用组织切片机将包埋的蜡块切成约5μm厚的切片。Р铺片:用眼科镊子镊起蜡带轻轻平铺在40~45℃的水面上,借水的张力和水的温度,将略皱的蜡带自然展平。Р贴片、烘片:待切片在恒温水面上充分展平后,将蜡片捞到载玻片的中段处倾去载玻片上的余水,置入60~65℃恒温箱内或切片漂烘温控仪的烘箱内烤片15~30分钟,脱去溶化组织间隙的石蜡。Р(5)H.E染色和封片及镜检РHE染色的染色剂的制备:Р苏木素染液配方(1000mL):苏木素2.5g,无水酒精25mL,硫酸铝钾(钾明矾)50g,或硫酸铝(铵明矾),蒸馏水 500mL,黄色氧化汞1.25g,冰醋酸20mLР 配制方法: 配制时,先将苏木素溶于酒精(平时也可将苏木素以10%的浓度溶解好,贮存备用),取一2000mL的三角烧瓶,倾入钾明矾,加入蒸馏水,于电炉上加热,熔解钾明矾,完全熔解后,待温度至90℃左右时,加入预先溶解好的酒精苏木素,继续加热至沸腾,延续3-5min,此时溶液逐渐加深,变为紫红色,拔离电源,加入黄色氧化汞,当充分氧化后,重新插上电源继续加热3-5min,此时溶液变深紫色,拔去电源,直接将三角烧瓶插入预先备好的冰水里,放于暗处,第二天过滤后加入冰醋酸即可。Р伊红染液配方(100mL):伊红1g,70-75%酒精100mL。Р配制方法:先将伊红用蒸馏水(少许)调成浆糊状,再加入酒精,边加边搅拌,直到彻底溶解,此时试剂有些混浊,取少许冰醋酸,加入到试剂中去,试剂逐渐转变为清亮,呈鲜红色即可。РH.E染色程序如下:脱蜡、脱苯、复水、染色、脱水、透明、封固。
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