后果,使工作前功尽弃。污染中特别注意一种呈乳白色的细菌污染,这种细菌为芽孢杆菌。法国林木育种协会鉴定为迟缓芽孢杆菌,它外被荚膜, 耐高温,一般消毒剂难以杀死。它可随培养材料、用具等传播;也可出现在培养基表面,或呈滴形云雾状存在培养基内,若出现时应严格灭菌,清洗和消毒用具,并更换消毒酒精。操作人员操作动作要熟练、动作快、规范,这样可以缩短操作时间, 减少污染。因为有很多组织培养的失败,从材料、培养基条件等方面检查均无问题,只是由于操作技术不熟练,如脱毒培养抽取茎尖很小,操作时间长了就会使茎尖失水变干,或不慎感染杂菌,再同时接种的环境又不是绝对无菌的。所以工作人员在进行无菌操作是要严守以下几点: 1、入无菌室前,要洗手,去掉指甲中的污物。 2、入室时要穿上经过消毒的工作服、帽子、口罩和鞋子等。 3、操作前要用 70% 的酒精擦洗工作人员的手,操作中要经常用酒精擦洗手。不准讲话,亦不准对着操作区呼吸,以免微生物污染材料、培养基和用具。每次重新操作都要把工具在火焰上消毒。 4、必须在酒精灯火焰处进行操作,如打开瓶口,转接材料。盖瓶盖前应将瓶口在火焰上烧一下,再将盖子也在火焰上烧一下,然后盖上Р[6]。Р第 4 章红掌诱导与继代培养过程中的污染Р初代培养获得的无菌材料在后期或继代培养也可能出现污染,这一方面是由于操作不慎的原因,另外即是由于初代培养中使用了营养相对简单的培养基有可能使污染不易表现出来,有时继代材料在培养室则可能被螨传播的真菌污染。对已污染的红掌组培苗,有时因植物材料难得或重新发生要花费很多时间,也可切取较大的植株重新消毒接种。李春燕等用 400 或 600 万单位/L 的青霉素无菌水溶液分别浸泡红掌组培细菌污染苗 60min 或 40min,可有效防治组培中的细菌污染。经处理过的苗继代培养时,不再重复出现细菌污染现象,且苗分化能力强,生根培养时,根系发达,移栽成活率高
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