养猪场自家苗制作方法[ 分享给朋友][ 收藏到猪 e微博] 养猪场,制作自家疫苗制作方法一、仪器恒温干燥箱、组织捣碎机、高压蒸气灭菌器、天平、烧杯、漏斗、铁架台、手术刀、手术剪、镊子、止血钳、广口瓶二、原料与物品甲醛、甘油、纱布、注射用生理盐水(无热源物质,以免注射时发生过敏反应,减少变态反应)、胶手套、自家病猪的内脏组织三、制作步骤 1灭菌将所需仪器、原料和物品进行高压灭菌。 2取样采取自家病猪的内脏器官和组织。一般原则:优先采取含毒量最高的组织或器官, 肝—脾—肾—肺—淋巴结(整个采样过程要求无菌操作)。 3去菌用注射用生理盐水洗去样品表面的细菌。 4剪碎用手术刀、手术剪将样品剪碎,去除其中的结缔组织、血管等难以捣碎部分。 5称重用天平称量所剪碎的样品,并记录好其重量。 6捣碎用组织捣碎机将称量好的样品捣碎,呈肉汤样,要求越碎越好。 7冻融将捣碎好的样品置于冰箱内反复冻融三次,冻融过程中前 4小时内,每隔 20分钟摇匀一次,尽量使病毒释放出来。 8过滤冻融后完全溶解之后,用纱布过滤两次,先用四层纱布过滤一次,再用八层纱布过滤一次即可 9稀释用注射生理盐水溶液以 1:5的比例将样品稀释。 10灭活在稀释好的样品中添加 0.4% 甲醛(灭活剂)和5~10% 甘油(保护剂),再将其置于37℃的恒温干燥箱内灭活 24~48 小时,尽量使病毒全部被灭活,但又必须最大限度地保持其抗原性。 11安全检测用小白鼠进行免疫接种,观察其反应和行为,同时剖解观察其病理变化。 12无菌检验用肉汤或琼脂培养基培养,观察其是否有细菌生长。 13 分装 14 免疫接种 15效力检验四、疫苗的使用说明 1保存 2~8 ℃冷藏 2保质期 6个月 3用法用量使用前必须先充分摇匀,以 2ML/ 头进行肌肉注射,于发病期前 10~15 天接种, 也可用于紧急接种,一般免疫接种后 10天左右产生免疫抗体。